Tủ an toàn sinh học: Quy trình hoạt động tiêu chuẩn

Mô tả chung

• Tủ an toàn sinh học, (BSC), còn được gọi là tủ che nuôi cấy mô, được thiết kế để cung cấp nhân sự, bảo vệ môi trường và sản phẩm khi thực hành và quy trình thích hợp được tuân thủ. BSC cấp II dựa vào chuyển động có hướng của không khí để ngăn chặn. Luồng không khí được hút vào lưới tản nhiệt phía trước của BSC, giúp bảo vệ nhân viên. BSC thường được sử dụng nhất là loại II A2. Loại BSC này không thích hợp với các dung môi dễ bay hơi.
• Việc lắp đặt BSC, chứng nhận bắt buộc hàng năm, khử nhiễm và bảo trì phải được thực hiện bởi các chuyên gia được chứng nhận (được Tổ chức Vệ sinh Quốc gia công nhận) hoặc bởi kỹ thuật viên Môi trường, Sức khỏe & An toàn (EHS) được chứng nhận. Việc bảo trì và chứng nhận sẽ được thực hiện theo Tiêu chuẩn Chăm sóc Kiểm soát Kỹ thuật EHS

Chuẩn bị BSC

• Xác nhận chứng chỉ BSC hàng năm (trong vòng 12 tháng) tại thời điểm hiện tại; thông tin được tìm thấy trên nhãn dán phía trước BSC.
• Vận hành quạt của BSC ít nhất 3-5 phút trước khi bắt đầu công việc để cho phép BSC “lọc sạch” các hạt bụi.
• Khử trùng tất cả các bề mặt bên trong của khu vực làm việc BSC bằng chất khử trùng bề mặt thích hợp (tức là chất tẩy 10%, sau đó là 70% ethanol).

Làm việc trong BSC

• Khi làm việc trong BSC, di chuyển cánh tay vào và ra từ từ, vuông góc với mặt mở để giảm sự gián đoạn của rèm không khí.
• Thực hiện tất cả các thao tác cách lưới tản nhiệt phía trước trên bề mặt làm việc ít nhất 10 cm.
• Không mang các vật liệu có khả năng bị ô nhiễm ra khỏi BSC cho đến khi chúng đã được khử nhiễm bề mặt.
• Có thể đặt tấm lót dưới dùng một lần trên bề mặt làm việc nhưng không được che các lỗ hở của lưới tản nhiệt phía trước hoặc phía sau. Việc sử dụng khăn lau tạo điều kiện thuận lợi cho việc dọn dẹp định kỳ và giảm sự tạo thành bọt khí và chất bắn tung tóe trong quá trình tràn ra ngoài.
• Đặt tất cả vật liệu càng xa càng tốt trong BSC, về phía mép sau của bề mặt làm việc và cách xa lưới tản nhiệt phía trước của BSC.
• Đặt thiết bị tạo khí dung (ví dụ như máy trộn xoáy, máy ly tâm đặt trên bàn) về phía sau của BSC.
• Không đặt bất kỳ đồ vật nào như giấy tờ, sổ ghi chép, v.v. lên lưới tản nhiệt phía trước.
• Không nên để các vật dụng lỏng lẻo hoặc có trọng lượng nhẹ (ví dụ như ống bọc pipet, khăn giấy, Kimwipes) bên trong BSC bất kỳ lúc nào để giảm nguy cơ bị hút vào khu vực ngăn chứa / động cơ của BSC.
• Quy trình làm việc phải từ “sạch đến bẩn”. Vật liệu và nguồn cung cấp nên được đặt trong BSC sao cho hạn chế sự di chuyển của các vật dụng “bẩn” sang các vật phẩm “sạch”.
• Khi hoàn thành công việc trong BSC, hãy áp dụng chất khử trùng thích hợp. Khi sử dụng rượu, nắp đậy BSC phải để mở để rượu bay hơi; Cửa kính có thể được hạ xuống sau khi đủ thời gian. Thời gian tối thiểu được khuyến nghị để cửa sổ tiếp tục mở là 10 phút.

Mở ngọn lửa trong BSC

• Đại học Michigan đã có quan điểm mạnh mẽ chống lại việc sử dụng đầu đốt gas hoặc ngọn lửa cồn trong BSC. Quyết định này đã được thực hiện theo khuyến nghị của nhiều cơ quan.
• Trung tâm Kiểm soát và Phòng ngừa Dịch bệnh (CDC) báo cáo rằng “không bắt buộc phải để lửa hở trong môi trường gần như không có vi khuẩn của tủ an toàn sinh học” và tạo ra “sự hỗn loạn làm gián đoạn dòng không khí cung cấp cho bề mặt làm việc,” gây nguy hiểm Đây cũng là khuyến cáo của Tổ chức Y tế Thế giới (WHO) cũng như các nhà sản xuất BSC lớn.
• Không được sử dụng ngọn lửa trần trong BSC.
• Nếu nhà nghiên cứu yêu cầu sử dụng ngọn lửa mở, nhân viên EHS sẽ gặp nhà nghiên cứu và thảo luận các vấn đề và giải pháp.
• Nếu thấy thực sự cần thiết cho công việc đang thực hiện, hãy sử dụng đầu đốt không có thí điểm hoặc đầu đốt siêu nhỏ dạng tấm cảm ứng an toàn để cung cấp ngọn lửa theo yêu cầu. Tham khảo Đánh giá việc sử dụng khí đốt tự nhiên và chất đốt Bunsen bên trong tủ an toàn sinh học để được hướng dẫn.

Đèn UV trong BSC

• CDC và Viện Y tế Quốc gia (NIH) đồng ý rằng đèn Tia cực tím (UV) không được khuyến nghị cũng như không bắt buộc trong BSC. Đèn UV phải được tắt khi phòng có người để bảo vệ mắt và da khỏi tiếp xúc với tia UV, có thể làm bỏng giác mạc và gây ung thư da. Việc sử dụng và làm sạch BSC đúng cách sẽ loại bỏ mọi nhu cầu sử dụng đèn UV. Nhiều yếu tố ảnh hưởng đến hoạt động của hiệu ứng diệt khuẩn của tia UV, đòi hỏi phải thường xuyên làm sạch, bảo trì và giám sát để đảm bảo hoạt động diệt khuẩn.

Thiết bị bảo vệ cá nhân

• Phải mang thiết bị bảo vệ cá nhân thích hợp (PPE). Áo khoác phòng thí nghiệm phải được cài cúc. Găng tay phải được kéo qua cổ tay của áo khoác phòng thí nghiệm, không được đeo bên trong áo khoác. PPE bổ sung được sử dụng theo khuyến nghị.

Xử lý chất thải

• Cần có hệ thống bình chân không để bảo vệ hệ thống chân không của tòa nhà trung tâm hoặc máy bơm chân không và cho nhân viên bảo dưỡng thiết bị. Hình dưới đây minh họa cách thiết lập thích hợp để xử lý chất thải lỏng.

• Bình hút bên trái (A) được sử dụng để thu thập các chất lỏng bị ô nhiễm vào một dung dịch khử nhiễm thích hợp; bình bên phải (B) đóng vai trò là bình thu gom chất lỏng tràn. Bộ lọc HEPA trong dòng (C) được sử dụng để bảo vệ hệ thống chân không (D) khỏi vi sinh vật.
• Kết nối bình chính với bình thu gom tràn và với bộ lọc HEPA trong dòng.
• Cả hai bình phải chứa chất khử trùng thích hợp cho vật liệu được sử dụng.
• Các bình chân không có thể được thiết lập trong BSC; tuy nhiên, để tiết kiệm diện tích, hệ thống có thể được đặt trên sàn bên dưới hoặc bên cạnh BSC, sử dụng thùng thứ cấp để chứa các bình và một ống nối dài hơn với hệ thống chân không.
• Sau khi quá trình ngừng hoạt động xảy ra, các vật liệu lỏng có thể được xử lý như chất thải không lây nhiễm trong bồn rửa.
• Đổ chất thải ra khỏi bình khi một trong các trường hợp sau đây xảy ra:
  • Hàng ngày
  • Hoàn thành quá trình hoặc thử nghiệm
  • Khi đầy ¾
• Các câu hỏi về chất thải khác được tạo ra từ quy trình này hoặc quy trình khác nên được chuyển đến Cơ quan Quản lý Vật liệu Nguy hiểm EHS (HMM). Văn phòng này cũng có thể hỗ trợ bạn trong việc giảm thiểu phát sinh chất thải, cung cấp các thùng chứa, nhãn và bảng kê khai chất thải.

Quy trình tràn

• Khi xảy ra sự cố tràn, an toàn cá nhân luôn phải đặt lên hàng đầu.
• Cảnh báo và dọn sạch mọi người ở khu vực gần nơi xảy ra tràn.
• Để biết thêm thông tin về các thủ tục ứng phó với sự cố tràn, hãy tham khảo trang Web Ứng phó Sự cố Tràn Chất thải Nguy hại của EHS.
• Sự tràn lan sinh học nhỏ hoặc lớn trong BSC
• Sự cố tràn nhỏ (nhỏ) là sự cố mà nhân viên phòng thí nghiệm có thể xử lý một cách an toàn mà không cần sự hỗ trợ của nhân viên an toàn và khẩn cấp. Trong trường hợp bị tràn nhỏ, hãy sử dụng thông tin sau để có quy trình dọn dẹp an toàn.
  • BSC phải hoạt động để bảo vệ người dùng.
  • Thông báo cho mọi người trong khu vực ngay lập tức bị tràn.
  • Mang thiết bị bảo hộ, bao gồm kính bảo hộ, găng tay và áo khoác dài tay.
  • Khử nhiễm tất cả các bề mặt và các vật dụng trước khi lấy ra khỏi BSC.
  • Che vết tràn bằng khăn giấy sau đó thấm chất khử trùng đã phủ đầy vết tràn.
  • Để chất khử trùng thời gian tiếp xúc 20 phút trước khi lau chất tràn.
  • Dùng kẹp / kẹp để nhặt khăn giấy để thải bỏ.
  • Lau sạch khu vực tràn bằng khăn mới tẩm chất khử trùng.
  • Thu thập tất cả các vật liệu thải vào túi hấp tiệt trùng và nồi hấp áp dụng các quy trình thích hợp.
  • Làm sạch khu vực tràn bằng chất khử trùng thích hợp (nghĩa là 10% thuốc tẩy, sau đó là 70% etanol).
  • Cho phép BSC chạy thêm 10 phút trước khi tiếp tục công việc hoặc tắt.
• Một vụ tràn lớn (lớn) cần sự hỗ trợ tích cực của nhân viên khẩn cấp. Không cố gắng làm sạch chất độc hại hoặc vật liệu tràn ra bên ngoài BSC. Trong trường hợp có sự cố tràn dầu lớn, hãy liên hệ với Ban An toàn và An ninh Công cộng (DPSS)
• Tủ an toàn sinh học cấp 2 – Class II Biological Safety Cabinet
• Nguyên lý hoạt động tủ an toàn sinh học
• Tủ an toàn sinh học cấp 3 (BSC Class III) – AC3-6B của Esco