Các sản phẩm liên quan: Hệ thống sắc ký lỏng hiệu năng cao
Đặc điểm lipid của mẫu sinh học, hay lipidome, có sự khác biệt đáng kể giữa tình trạng sức khỏe và bệnh tật. Do đó, lipid là ứng cử viên tốt để tạo ra các dấu ấn sinh học mạnh. Theo quan điểm phân tích, phân tích lipidome liên quan đến một số lượng lớn các hợp chất đồng phân, khiến việc tách toàn diện trở nên cần thiết để tạo ra một tập dữ liệu thông tin sinh học.
Để đạt được sự tách biệt đủ, thời gian phân tích bằng các phương pháp tiêu chuẩn, thường sử dụng pha tĩnh C18, có xu hướng dài hơn và thường có thời gian chạy >20 phút. Tuy nhiên, các phép đo nhóm mẫu lâm sàng lớn (>200 mẫu mỗi lô) yêu cầu thời gian chạy ngắn hơn để duy trì độ tin cậy tổng thể và cải thiện hiệu quả chi phí của quá trình phân tích. Ví dụ này sử dụng các mẫu huyết tương của người để chứng minh rằng việc tách dưới 10 phút cũng có thể thực hiện được với các mẫu thực bằng cách sử dụng cột YMC Accura Triart C8 ít kỵ nước hơn với lớp phủ bioinert để tạo điều kiện cho mức độ nhạy và phục hồi cao hơn.
Hình 2 cho thấy sự tách biệt được xác định rõ ràng giữa các lớp lysolipid, phospholipid và triglyceride, đặc trưng cho phân tích lipidomic pha đảo ngược. Ngay cả với sự biến đổi YMC-Triart C8 ít kỵ nước hơn, các loài phân tử của lipid phức hợp vẫn có thể được tách ra một cách khả thi trong một lần chạy nhanh, như đã thấy từ sắc ký đồ TIC. Do đó, khoảng 700 phân tử riêng biệt có thể được xác định một cách đáng tin cậy trong quá trình phân tích nhanh này tùy thuộc vào hiệu suất MS/MS của máy quang phổ. Pha tĩnh YMC-Triart C8 có diện tích bề mặt riêng rất cao là 360m²/g, cung cấp khả năng tải đủ để chứa các mẫu có hàm lượng chất phân tích rất cao, chẳng hạn như chiết xuất lipid huyết tương.
Ví dụ, Hình 3 cho thấy độ phân giải sắc ký của một số lipid rửa giải sớm, trung bình và muộn. LPC rửa giải sớm và LPE rửa giải trung bình và PC rửa giải trung bình có thể được tách ra với độ phân giải phù hợp. Phương pháp LC-MS này cũng phù hợp để xác định đặc tính của triglyceride rửa giải muộn với khả năng lưu giữ tương tự.
Cột YMC Accura Triart C8 được sử dụng được trang bị lớp phủ trơ sinh học trên thân cột và các tấm frit. Điều này đảm bảo khả năng phục hồi cao từ lần tiêm đầu tiên vì lipid chứa nhóm phosphate không tiếp xúc với bề mặt kim loại, ngăn ngừa sự hấp phụ. Hai mươi lần tiêm liên tiếp chứng minh rằng cột cung cấp kết quả đáng tin cậy từ lần tiêm đầu tiên.
* Dữ liệu ứng dụng do Sergey Girel, Viện Khoa học Dược phẩm Tây Thụy Sĩ (Đại học Geneva), Geneva, Thụy Sĩ cung cấp.